Prensip
Elektwoforèz fim acetate seluloz se yon metòd elektwoforèz lè l sèvi avèk yon fim acetate seluloz kòm yon sipò. Fenomèn nan ki patikil chaje deplase nan direksyon elektwòd opoze a anba aksyon an nan jaden elektrik yo rele elektwoforèz. Piske chak pwoteyin gen yon pwen izoelektrik espesifik, si yo mete yon pwoteyin nan yon solisyon ki gen yon pH pi ba pase pwen izoelektrik li a, pwoteyin lan pral chaje pozitivman epi li deplase nan direksyon elektwòd negatif la. Okontrè, li deplase nan poto pozitif la. Paske vitès molekil pwoteyin k ap deplase nan yon jaden elektrik gen rapò ak chaj yo, fòm ak gwosè molekil yo, diferan pwoteyin ka separe pa elektwoforèz. Serom gen yon varyete de pwoteyin, yo tout gen pwen izoelektrik nan pH 7.5 oswa mwens. Lè yo mete serom nan tanpon pH 8.6 pou fè elektwoforèz, tout pwoteyin serom yo chaje negatif epi yo pral deplase nan direksyon pou bò pozitif nan jaden elektrik la. Depi plizyè pwoteyin serik gen chaj diferan nan menm pH la, patikil molekilè yo diferan nan gwosè, e konsa vitès migrasyon an diferan, epi yo separe pa elektwoforèz. Pwen izoelektrik ak pwa molekilè pwoteyin serik yo montre nan tablo ki anba a:
| Pwoteyin | Pwen izoelektrik (PI) | Pwa molekilè |
| Albumin | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-gloulin | 6.85 ~ 7.50 | 156 000 ~ 300 000 |
Eksperyans lan se separe pwoteyin diferan nan serom san ak manbràn acetate seluloz (abbr. CAM) kòm medya sipò. CAM se yon kalite loos kimenefim ak bon inifòm, ak epesè a se 0.1mm-1.5mm, ki gen yon sèten absòpsyon dlo.
Materyèl, enstriman ak reyaktif pou elektwoforèz CAM
Echantiyon:serom san moun ki an sante
Enstriman:ekipman pou pouvwa DYY-6C, tank elektwoforèz DYCP-38C, echantiyon siperyè loading WD-9404
Reyaktif yo
1) seluloz acetate manbràn 7X9cm
2) PH 8.6 barbitol tanpon solisyon (fòs iyonik 0.05-0.09, li se 0.06tid tan.): pran 1,84g Diethyl barbituric asid, ak Lè sa a, pran 1.03g Diethyl sodyòm pentobarbital, ajoute kèk dlo distile nan chalè fonn, epi fè jiska 1000ml;
3) tach: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, ajoute 100ml dlo distile;
4) TBS/T oswa PBS/T: 45ml 95% etanòl, 5ml glacial asid acetic, ajoute 50ml dlo distile;
5) Solisyon netwayaj: 70ml etanòl anidrid, 30ml asid acetic glacial.
Eksperyans Method
1) Prepare manbràn an: Plonje manbràn an nan solisyon tanpon barbitol 30min-8h, epi retire li, retire solisyon siplemantè a pa papye absòbe.
2) Chaje echantiyon yo: distenge bò ki graj ak bò ki lis nan manbràn an, epi make yon liy nan distans 1.5cm nan fen an tèt sou bò ki graj. Chaje echantiyon pa zouti siperyè chaje echantiyon sou bò ki graj. Remak: echantiyon yo ta dwe chaje sou bò ki graj manbràn. Apre echantiyon serom yo konplètman antre nan manbràn, vire sou manbràn an, mete bò ki graj (ak echantiyon) fas desann nan tank la, epi yo mete fen a ak echantiyon yo nan elektwòd negatif.
3) Elektwoforèz: Vire ekipman pou pouvwa a, 0.4～0.6m A / cm manbràn, tan an kouri se 30-45 min. Apre kouri elektwoforèz, fèmen pouvwa a.
4) Tach ak pwòp: Retire manbràn nan tank la, epi plonjeit nan solisyon an lank pou 5 min, ak Lè sa a, netwaye li nan solisyon an netwayaj sou yo ak sou pou 3-4 fwa jiskaske koulè background nan klè. Pwoteyin serik yo ta dwe montre sou gwoup yo, epi nòmalman gen senk zòn, fòme tèt nan liy ki make, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Konsèvasyon: mete sèk elèktroforèz labannnan solisyon netwayaj pou 10-15 minit, ak Lè sa a, pran li epi kole li sou yon vè pwòp, apre li fin seche, li pral vin yon fim transparan.bann.
EksperyansRezilta
Efè separasyon echantiyon sewòm yo bon, e pa gen okenn fenomèn band tailing. Repetibilite nan rezilta yo varye akòz pwosedi tès yo ak metòd eksperimantè a, ak repetibilite a wo.
Konklizyon
Sistèm deteksyon rapid elektwoforèz klinik la (Tank elektwoforèzDYCP-38C,ekipman pou pouvwaDYY-6C ak siperyè echantiyon chaje WD-9404) te pwodwi pa noukonpayi Beijing Liuyi Biotechnologie co, Ltdsatisfè kondisyon eksperimantal yo,epirezilta yo se repwodiktif, senp ak vit, apwopriye pouansèymanrechèch.
Beijing LiuyiBiotechnology co, Ltd espesyalize nan fabrikasyon pwodwi elèktroforèz pou endistri syans lavi, kigen plis pase 50 ane istwa nan Lachin ak konpayi an ka bay pwodwi ki estab ak-wo kalite atravè mond lan. Atravè ane nan devlopman, li merite pou yo chwazi ou!
Nou ap chèche kounye a patnè, tou de tank elektwoforèz OEM ak distribitè yo akeyi.
Pou plis enfòmasyon sou nou, tanpri kontakte nou pa imel[imel pwoteje]oswa[imel pwoteje].
Tan pòs: Nov-14-2022