Eksperyans elektwoforèz emoglobin

Prensip Eksperyans

Elektwoforèz emoglobin gen pou objaktif pou detekte ak konfime divès kalite emoglobin nòmal ak nòmal.

Akòz chaj yo diferan ak pwen izoelektrik nan diferan kalite emoglobin, nan yon sèten solisyon tanpon pH, lè pwen izoelektrik nan emoglobin pi ba pase pH la nan solisyon an tanpon, emoglobin pote yon chaj negatif ak imigre nan direksyon anod la pandan elektwoforèz. Kontrèman, emoglobin ak yon chaj pozitif deplase nan direksyon katod la.

Anba yon sèten vòltaj ak apre yon tan espesifik elektwoforèz, emoglobin ak chaj diferan ak pwa molekilè montre diferan direksyon migrasyon ak vitès. Sa a pèmèt pou separasyon nan zòn diferan, ak analiz kolorimetrik oswa elektwoforetik analiz ki vin apre yo ka fèt sou zòn sa yo pou quantifier emoglobin divès kalite. Metòd ki pi souvan itilize se pH 8.6 seluloz acetate manbràn elektwoforèz.

Nan sitoplasm la, gwoup ethylene glycol (CHOH-CHOH) prezan nan glikojèn oswa sibstans polisakarid (tankou mucopolysaccharides, mucoproteins, glikoprotein, glikolipid, elatriye) yo soksid pa asid peryodik ak konvèti nan gwoup aldehyde (CHO-CHO). Gwoup aldehyde sa yo konbine avèk reyaktif Schiff ki pa koulè wouj violèt-wouj, ki fòme yon lank koulè wouj violèt ki depoze kote polisakarid yo prezan nan selil la. Reyaksyon sa a ke yo rekonèt kòm tach peryodik asid-Schiff (PAS), ansyen refere yo kòm tach glikojèn.

Metòd Eksperyans

Materyèl:Acetate selulozmembrane, aparèy elektwoforèz(DYCP-38C ak ekipman pou pouvwa DYY-6C), Siperyè Egzanp Loading Zouti (pipèt), espektrofotomèt, kivèt kolorimetrik, tanpon.

Tanpon:

(1) Tanpon pH 8.6 TEB: Peze 10.29 g Tris, 0.6 g EDTA, 3.2 g asid borik, epi ajoute dlo distile nan 1000 ml.

(2) Tanpon Borat: Peze 6.87 g boraks ak 5.56 g asid borik, epi ajoute dlo distile a 1000 ml.

Pwosedi:

Preparasyon nan solisyon emoglobin

Pran 3 ml san ki gen eparin oswa sitrat sodyòm kòm yon anticoagulant. Santrifije a 2000 rpm pou 10 minit epi jete plasma a. Lave globil wouj yo twa fwa ak saline fizyolojik (750 rpm, 5 minit santrifujasyon chak fwa). Santrifije a 2200 rpm pou 10 minit epi jete supernatant la. Ajoute yon kantite egal dlo distile, apresa ajoute 0.5 fwa volim tetrachloride kabòn. Souke kouray pou 5 minit, epi answit santrifuje a 2200 rpm pou 10 minit pou kolekte solisyon Hb anwo a pou itilize pita.

Tranpe manbràn la

Koupe manbràn acetate seluloz la an bann ki mezire 3 cm × 8 cm. Tranpe yo nan tanpon pH 8.6 TEB jiskaske yo konplètman satire, apresa retire epi seche ak papye filtre.

Tachte

Sèvi ak yon pipèt pou tach 10 μl nan solisyon emoglobin vètikal sou manbràn acetate seluloz la (bò ki graj), apeprè 1.5 cm soti nan kwen an.

Elektwoforèz

Vide solisyon tanpon borat la nan chanm elektwoforèz la. Mete manbràn acetate seluloz la ak bò takte nan fen katod chanm lan. Kouri nan 200 V pou 30 minit.

Elisyon

Koupe zòn HbA ak HbA2, mete yo nan tib tès separe, epi ajoute 15 ml ak 3 ml dlo distile, respektivman. Souke dousman pou elimine emoglobin la nèt, apresa melanje.

Kolorimetri

Zewo absorpsyon an lè l sèvi avèk dlo distile pou solisyon elisyon an epi mezire absorpsyon an nan 415 nm.

Kalkil

HbA2 (%) = Absòbsyon tib HbA2 / (Absorbans tib HbA × 5 + Absorbans tib HbA2) × 100%

Kalkil rezilta eksperimantal

Ranje Referans pou pH 8.6 TEB Tanpon Seluloz Acetate Elektwoforèz: HbA> 95%, HbA2 1% -3.1%

Nòt

Tan elektwoforèz pa ta dwe twò lontan. Manbràn acetate seluloz la pa ta dwe sèk pandan elektwoforèz. Sispann elektwoforèz lè HbA ak HbA2 byen klè separe. Elektwoforèz pwolonje ka lakòz difizyon bann ak flou.

Evite itilize twòp echantiyon. Twòp likid emoglobin ka mennen nan detachman gwoup oswa ensifizan tach, sa ki lakòz fo nivo HbA ki wo.

Anpeche kontaminasyon manbràn acetate seluloz la ak pwoteyin.

Aktyèl la pa ta dwe twò wo; otreman, bann emoglobin ka pa separe.

Toujou enkli espesimèn ki soti nan moun nòmal ak nesesè li te ye emoglobin nòmal kòm kontwòl.

Beijing Liuyi Biotechnology fabrike tank elektwoforèz pwofesyonèl pou elektwoforèz emoglobin ki se modèl la.DYCP-38Ctank elektwoforèz manbràn acetate seluloz, e gen de modèl ekipman pou elektwoforèz elektwoforèz ki disponib pou tank elektwoforèz manbràn seluloz acetate.DYY-2CepiDYY-6Cekipman pou pouvwa.

Pandan se tan, Beijing Liuyi Biotechnology bay manbràn acetate seluloz pou kliyan, ak gwosè a nan manbràn acetate seluloz ka Customized. Byenveni nan mande nou echantiyon ak plis enfòmasyon.

Mak Beijing Liuyi gen plis pase 50 ane istwa nan Lachin ak konpayi an ka bay pwodwi ki estab ak-wo kalite atravè mond lan. Atravè ane nan devlopman, li merite pou yo chwazi ou!

Nou ap chèche kounye a patnè, tou de tank elektwoforèz OEM ak distribitè yo akeyi.

Si ou gen nenpòt plan achte pou pwodwi nou yo, tanpri pa ezite kontakte nou. Ou ka voye mesaj nou nan imèl[imel pwoteje]oswa[imel pwoteje], oswa tanpri rele nou nan +86 15810650221 oswa ajoute Whatsapp +86 15810650221, oswa Wechat: 15810650221