Ki sa ki elektwoforèz jèl poliakrilamid?

Elektwoforèz jèl poliakrilamid

Elektwoforèz jèl se yon teknik fondamantal nan laboratwa atravè disiplin byolojik yo, ki pèmèt separasyon makromolekil tankou ADN, RNA ak pwoteyin. Diferan medya separasyon ak mekanis pèmèt sous-ansanm molekil sa yo separe pi efikasman lè yo eksplwate karakteristik fizik yo. Pou pwoteyin an patikilye, elektwoforèz jèl poliakrilamid (PAGE) se souvan teknik chwa.

PAGE se yon teknik ki separe makromolekil tankou pwoteyin ki baze sou mobilite elektwoforetik yo, se sa ki, kapasite nan analit pou avanse pou pi nan direksyon pou yon elektwòd nan chaj opoze a. Nan PAGE, sa a detèmine pa chaj la, gwosè (pwa molekilè) ak fòm molekil la. Analit yo deplase nan porositë ki fòme nan jèl poliakrilamid. Kontrèman ak ADN ak RNA, pwoteyin yo varye an chaj selon asid amine yo enkòpore, ki ka enfliyanse fason yo kouri. Fisèl asid amine yo ka fòme tou estrikti segondè ki gen enpak sou gwosè aparan yo ak kidonk sou fason yo kapab deplase nan porositë yo. Se poutèt sa, pafwa, li ka dezirab denatire pwoteyin anvan elektwoforèz pou linearize yo si yo mande yon estimasyon ki pi egzak nan gwosè.

SDS PAJ

Sodyòm-dodecyl sulfat poliakrilamid jèl elektwoforèz se yon teknik ki itilize pou separe molekil pwoteyin nan mas 5 a 250 kDa. Pwoteyin yo separe sèlman sou baz pwa molekilè yo. Sodyòm dodecyl silfat, yon surfactant anionik, ajoute nan preparasyon jèl ki maske chaj yo intrinsèques nan echantiyon pwoteyin yo epi ba yo yon chaj menm jan ak rapò mas. Nan mo senp, li denatire pwoteyin yo epi li ba yo yon chaj negatif.

PAJ natif natal

Native PAGE se yon teknik ki sèvi ak jèl ki pa denatire pou separasyon pwoteyin yo. Kontrèman ak SDS PAGE, pa gen okenn ajan denaturasyon ajoute nan preparasyon an nan jèl. Kòm yon rezilta, separasyon pwoteyin yo pran plas sou baz chaj ak gwosè pwoteyin yo. Nan teknik sa a, konfòmasyon, plisman ak chèn asid amine nan pwoteyin yo se faktè sa yo ke separasyon an depann sou. Pwoteyin yo pa domaje nan pwosesis sa a, epi yo ka refè apre yo fin fini nan separasyon.

Ki jan elektwoforèz jèl poliakrilamid (PAGE) travay?

Prensip debaz PAGE la se separe analit yo lè w pase yo nan porositë yon jèl poliakrilamid lè l sèvi avèk yon kouran elektrik. Pou reyalize sa, yon melanj akrilamid-bisakrilamid polymerize (polyacrylamid) pa adisyon persulfat amonyòm (APS). Reyaksyon an, ki katalize pa tetramethylethylenediamine (TEMED), fòme yon estrikti nèt tankou porositë nan ki analit yo ka deplase (Figi 2). Pi gwo pousantaj akrilamid total ki enkli nan jèl la, se pi piti gwosè pò a, kidonk pi piti pwoteyin yo ki pral kapab pase. Rapò a nan akrilamid ak bisakrilamid pral tou gen enpak sou gwosè pò yo men sa a se souvan kenbe konstan. Pi piti gwosè pò tou redwi vitès la nan ki ti pwoteyin yo kapab deplase nan jèl la, amelyore rezolisyon yo ak anpeche yo kouri ale nan tanpon an rapidman lè yo aplike aktyèl la.

Ekipman pou elektwoforèz jèl Polyacrylamid

Jèl Elektwoforèz selil (tank/chanm)
Tank jèl pou elektwoforèz jèl poliakrilamid (PAGE) diferan de tank jèl agarose la. Tank jèl agaroz la orizontal, pandan tank PAGE la vètikal. Pa selil elektwoforèz vètikal (tank/chanm), yon jèl mens (nòmalman 1.0mm oswa 1.5mm) vide ant de plak vè ak monte pou ke anba a nan jèl la submerged nan tanpon nan yon chanm ak tèt la submerged nan tanpon. nan yon lòt chanm. Lè aktyèl la aplike, yon ti kantite tanpon imigre nan jèl la soti nan chanm anwo a nan chanm anba a. Avèk kranpon fò pou garanti asanble a rete nan yon pozisyon dwat, ekipman an fasilite rapid jèl kouri ak menm refwadisman sa ki lakòz bann diferan.

Beijing Liuyi Biotechnology co, Ltd (Liuyi Biotechnology) fabrike yon seri de gwosè nan selil elektwoforèz jèl polyacrylamid (tank / chanm). Modèl DYCZ-20C ak DYCZ-20G yo se selil elektwoforèz vètikal (tank/chanm) pou analiz sekans ADN. Gen kèk nan selil elektwoforèz vètikal yo (tank/chanm) yo konpatib ak sistèm blotting, tankou modèl DYCZ-24DN, DYCZ-25D ak DYCZ-25E yo konpatib ak modèl Western Blotting sistèm DYCZ-40D, DYCZ-40G ak DYCZ-40F, ki itilize pou transfere molekil pwoteyin soti nan jèl la nan manbràn. Apre elektwoforèz SDS-PAGE, Western Blotting se yon teknik pou detekte yon pwoteyin espesifik nan yon melanj pwoteyin. Ou ka chwazi sistèm blotting sa yo selon kondisyon eksperimantal yo.

Elektwoforèz Power Supply
Pou bay elektrisite pou kouri jèl la, w ap bezwen yon ekipman pou elektwoforèz. Nan Liuyi Biotechnology nou bay yon seri de ekipman elektwoforèz pouvwa pou tout aplikasyon. Modèl DYY-12 ak DYY-12C ak vòltaj segondè ki estab ak aktyèl ka satisfè elektwoforèz egzijans vòltaj segondè. Li gen fonksyon kanpe, distribisyon, VH ak aplikasyon etap pa etap. Yo ideyal pou aplikasyon elektwoforèz sekans IEF ak ADN. Pou aplikasyon jeneral pwoteyin ak ADN elektwoforèz, nou gen modèl la DYY-2C, DYY-6C, DYY-10, ak sou sa, ki se tou cho lavant pouvwa founiti ak selil elektwoforèz (tank / chanm). Sa yo ka itilize pou aplikasyon pou elektwoforèz vòltaj mwayen ak ba, tankou pou itilizasyon laboratwa lekòl la, laboratwa lopital ak sou sa. Plis modèl pou ekipman pou pouvwa, tanpri vizite sit entènèt nou an.

Mak Liuyi a gen plis pase yon istwa 50 ane nan Lachin ak konpayi an ka bay pwodwi ki estab ak-wo kalite atravè mond lan. Atravè devlopman ane yo, li merite chwa ou!

Pou plis enfòmasyon sou nou, tanpri kontakte nou pa imel[imel pwoteje] or [imel pwoteje].

Referans pou Ki sa ki elektwoforèz jèl poliakrilamid?
1. Karen Steward PhD Elektwoforèz jèl poliakrilamid, Ki jan li fonksyone, varyasyon teknik, ak aplikasyon li yo